非洲豬瘟分子檢測羅氏解決方案
非洲豬瘟分子檢測羅氏解決方案
• 背景介紹
• 分子檢測樣本前處理
• 核酸抽提
• qPCR檢測
• 小結(jié)
非洲豬瘟定義
• 非洲豬瘟是家豬、疣豬、歐洲野豬和美洲野豬的一種傳染性極強(qiáng)的出血性疾病,所有年齡的豬都易感。
• 可表現(xiàn)為最急性、急性、亞急性和慢性四種形式
• 急性型以高熱、食欲廢絕、皮膚發(fā)紺、網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)出血為特征,發(fā)病后2-10天內(nèi)死亡,病死率可高達(dá)100%
• 只感染豬,家豬和歐亞野豬非常易感,感染后存活的豬可能變?yōu)闊o癥狀的攜帶者
• 目前沒有疫苗。!
• 病原為– Asfarviridae Asfivirus (ASFV),已知唯一核酸為DNA的蟲媒病毒
傳播途徑
• 軟蜱是ASFV的自然界貯主,并且可以作為傳播媒介
• ASFV也可經(jīng)口 - 鼻途徑,通過接觸感染動物排泄分泌物,通過攝入豬肉或其他受污染的產(chǎn)品,或通過污染物間接傳播。
• ASFV還可從一個養(yǎng)殖場傳播到另個養(yǎng)殖場,動物或設(shè)備的流動,喂養(yǎng)污染的飼料等都可以導(dǎo)致病毒的傳播。另外即使在沒有感染豬群的情況下,有時(shí)ASFV在冷藏或冷凍肉中也可以長期持續(xù)存在,并且一旦這些肉類產(chǎn)品以泔水形式飼喂家豬,疫病就會重新出現(xiàn)。
檢測重要性
• OIE動物衛(wèi)生法典要求必須報(bào)告的動物疫病
• 我國動物疫病名錄一類動物疫病
• 我國《中長期動物疫病防治規(guī)劃(2012-2020年)》 明確重點(diǎn)防范的外來動物疫病
病原體特性-抵抗力強(qiáng)
• 存活溫度:
– 60℃ 20分鐘
– 56℃ 70分鐘
– 25-37 ℃ 數(shù)周
– 4 ℃ >1年
– 凍肉 數(shù)年到數(shù)十年
• 存活pH:
– 4~11.5 無血清
– 4~13.4 有血清
– 未熟肉品、腌肉、泔水中可長時(shí)間存活
截至2018年11月22日,國內(nèi)已累計(jì)捕殺60萬只感染ASFV生豬。
羅氏診斷
• 羅氏可以提供ASFV分子檢測全套解決方案
• 羅氏手動/自動核酸純化,使用同一個試劑盒就可兼容不同類型樣本同時(shí)提取, ASFV核酸提取樣本類型多,羅氏可以提供快速便捷的核酸提取方法
• 接受原始管,具有快速提取模式
• ASFV檢測常見試劑盒均可在羅氏平臺上使用,并且已經(jīng)得到驗(yàn)證
• 國家下發(fā)的標(biāo)準(zhǔn)品可以配套使用羅氏熒光定量預(yù)混液進(jìn)行檢測,并也已得到驗(yàn)證
• 羅氏分子檢測快速解決方案(核酸純化1h、熒光定量PCR快速升降溫檢測)特別符合ASFV檢測需求
• 全自動核酸提取可采用投放模式,成本大大降低
• 熒光定量PCR無需后期維護(hù)無需光路校正,開放式耗材,光源壽命長
• 全國1000位工程師,免費(fèi)上門服務(wù)
• 公司具有CC部門,負(fù)責(zé)客戶使用及培訓(xùn)
• 部門具有SV團(tuán)隊(duì),可協(xié)助用戶設(shè)計(jì)并優(yōu)化方案,隨時(shí)解答實(shí)驗(yàn)中的問題
完善的備用機(jī)政策(沈陽雙匯48小時(shí)內(nèi)完成樣機(jī)培訓(xùn)及使用)
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